Phát triển phương pháp multiplex RT-LAMP phát hiện nhanh vi-rút gây hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn (PRRSV)

Abstract

Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn là một trong những bệnh phức tạp và nguy hiểm nhất, với tỉ lệ tử vong cao cho cả đàn lợn. Cho đến nay, việc chẩn đoán bệnh vẫn dựa chủ yếu vào các dấu hiệu lâm sàng khi lợn phát bệnh và các phương pháp dùng kháng thể, chẩn đoán phân tử RT-PCR thường đòi hỏi nhiều thời gian và kĩ thuật phức tạp cho xét nghiệm bệnh. Trong khi đó, phương pháp khuếch đại đẳng nhiệt RT-LAMP thừa hưởng tất cả ưu điểm của PCR về độ nhạy, độ đặc hiệu nhưng kĩ thuật đơn giản và thời gian thực hiện nhanh chóng. Vì thế, mục tiêu chính của nghiên cứu này là xây dựng quy trình phát hiện nhanh vi rút gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn (PRRSV) bằng multiplex RT-LAMP. Quy trình multiplex RT-LAMP được tối ưu trong nghiên cứu có khả năng phát hiện trình tự mục tiêu PRRSV với giới hạn phát hiện 10^0,5 TCID₅₀/mL, phản ứng được thực hiện tại một nhiệt độ cố định (65 °C) trong thời gian 25 phút, có thể đọc kết quả nhanh bằng mắt thường thông qua màu sắc của phản ứng.

® 2023 Journal of Science and Technology - NTTU