Một xét nghiệm Polymerase Spiral Reaction mới để phát hiện nhanh các gen Staphylococcus aureus kháng penicillin

Abstract

Bài báo đã phát triển phương pháp trực quan phản ứng phân tử nhằm phát hiện chủng Staphylococcus aureus kháng penicillin dựa trên phản ứng xoắn ốc polymerase (PSR). Phương pháp này thực hiện phản ứng trong điều kiện đẳng nhiệt bằng cách sử dụng enzyme Bst DNA polymerase và hai cặp mồi được thiết kế nhắm mục tiêu vào gen blaZ mã hóa tính kháng penicillin ở S. aureus. Khi khảo sát điều kiện phản ứng cho thấy, ở nhiệt độ 65 °C và nồng độ cặp mồi F2/R2 = 0,1 µM và F1-Nr/R1-N = 1,6 µM, thì phản ứng PSR cho kết quả tối ưu chỉ trong vòng 50 phút. Giới hạn phát hiện của phương pháp PSR với DNA bộ gen và tế bào vi khuẩn lần lượt là 10 pg/μL và 5 CFU/mL trên mỗi phản ứng, nhạy hơn so với phương pháp PCR. Ngoài ra, phương pháp này có tính đặc hiệu cao, do không xảy phản ứng chéo với các chủng vi khuẩn gây bệnh khác. Kết quả cho thấy phương pháp xét nghiệm PSR dễ thực hiện, có độ tin cậy cao; nên được ứng dụng để kiểm tra và khảo sát thực trạng kháng penicillin của S. aureus trong bệnh viện và cộng đồng.

® 2023 Journal of Science and Technology - NTTU